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有关紫外分光光度计测物质浓度的结果分析
发布日期：2017-02-15 浏览次数：2657
许多实验室在使用紫外分光光度计进行定量分析时，都是采用读取样品吸光度（A表示）的方式，将结果带入标准曲线求算待测物质的浓度，可是有时浓度计算的结果，特别是在杂质或有害物质含量测定时，会出现负值，这是怎么回事呢？
在某些实验中，待测物质的含量是非常低的，可能低于了仪器的检出限，也就是低于了仪器的检测能力，对于仪器来说，含量近似于零，也就是说，样品溶液近似于溶剂，读数的结果近似为零。零值的出现在有些情况下是大家可以接受和解释的，那么负值呢？
如果浓度出现负值有两种不同的情况需要讨论：
1.吸光度小于零，浓度小于零：
吸光度的重复性是考量仪器性能的重要指标，代表了同一样品多次测量，结果之间的吻合程度。由于紫外分光光度计和环境的波动，每次的读数值会在一定范围能存在正负偏差。那么如果理论结果为零，而实际的吸光度读数可能会在零值的左右有一定的浮动，即会有负值的出现。吸光度小于零，浓度的计算值也可能小于零。但是负值不能超出仪器重复性的限度。
2.吸光度大于零，浓度小于零：
由吸光度求算浓度通常通过标准曲线法来执行，使用不同浓度的标样，依次测定吸光度，以浓度C和吸光度A按照小二乘法进行线性拟合，线性方程为A=k*C+b的形式。如果曲线在y轴的截距b为正值，那么在A＜b的时候，浓度C会出现负值。
综上所述，紫外分光光度计在使用过程中出现负值并不奇怪，关键是应当根据具体案例进行分析，如果符合以上两种情况，我们可以讨论负值的大小是否在合理范围内，如果合理，我们通常以小于仪器检出限进行报告。如果负值的值已经超出合理范围，通常可以选择重新读取空白，或重新制备空白溶液和样品溶液后重复测试。
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