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紫外分光光度计有关测量条件的讨论
发布日期:2017-05-12 浏览次数:1387
紫外分光光度计采用双光束光学系统,成功实现了高精度和高可靠性测量的结合,可满足各种应用的要求,可用在生物研究、生物工业、药物分析、制药、教学研究、环保、食品卫生、临床检验、卫生防疫等领域。
紫外分光光度计改良优化的光路设计、进口光源和接收器造就了系统高性能和高可靠性;它还拥有丰富的测量方法,具有波长扫描、时间扫描、多波长测定、多阶导数测定、双波长、三波长DNA蛋白质测量等多种测量方法,可满足不同测量的要求。
紫外分光光度计测定除需从试样的角度选择合适的显色反应和显色条件外,还需从紫外分光光度计的角度选择适宜的测定条件保证测定结果的准确度。
1.入射光波长的选择:在大吸收波长处测定吸光度不仅能获得高的灵敏度,而且还能减少由非单色光引起的对朗伯-比尔定律的偏离。因此在紫外分光光度计的分光光度法测定中一般选择大吸收波长为入射波长。
2.参比溶液的选择:在实验中,要选择合适的空白溶液作为参比溶液来调节紫外分光光度计的零点,以便消除显色溶液中其他有色物质的干扰,抵消吸收池和试剂对入射光的影响。根据试样溶液的性质,选择合适组分的参比溶液很重要。
3.吸光度范围选择与控制:任何紫外分光光度计都有一定的测量误差,测量误差的来源主要是光源的发光强度不稳定法,光电效应的非线性,电位计的非线性,杂散光的影响,单色器的光不纯等因素,对于一台固定的紫外分光光度计来说,以上因素都是固定的,也就是说它的误差具有一定稳定性。
4.比色皿的使用:选择适宜规格的比色皿。同一实验使用同一规格的同一套比色皿,以减少测量误差,所以用普通分光光度法不适用于高含量或极低含量物质的测定。
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