欢迎进入屹谱仪器制造(上海)有限公司!
产品分类
您现在的位置:首页 > 新闻中心 > 紫外分光光度计如何避免吸光值漂移
紫外分光光度计如何避免吸光值漂移
  • 发布日期:2017-03-06      浏览次数:1760
    •   紫外分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。核酸的定量是紫外分光光度计使用频率高的功能。
        紫外分光光度计读数不稳定可能是用户头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和度。
        ·核酸本身物化性质
        溶解核酸的缓冲液的pH值、离子浓度等,在测试时,离子浓度太高也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液(如TE)可大大稳定读数。核酸的吸光值受pH值和缓冲液离子浓度影响。只有在一定的pH值和低离子浓度的条件下,才能得到的检测结果。水的pH值不稳定,可能导致检测误差。一些缓冲液在紫外范围内存在自身吸收,为了确保准确测量,请使用与悬浮或洗脱样品时相同的缓冲液。
        ·样品的稀释浓度
        同样是不可忽视的因素,由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了大程度减少颗粒对测试结果的影响,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值好在0.1-1.5 A。在此范围内,颗粒的干扰相对较小,结果稳定。从而意味着样品的浓度不能过低,或者过高(超过紫外分光光度计的测试范围)。
        ·操作因素
        如混合要充分,否则吸光值太低,甚至出现负值;混合液不能存在气泡,空白液无悬浮物,否则读数漂移剧烈;必须使用相同的比色杯测试空白液和样品,否则浓度差异太大;换算系数和样品浓度单位选择一致;不能采用窗口磨损的比色杯;样品的体积必须达到比色杯要求的小体积等多个操作事项。
     
    QQ在线咨询
    咨询热线
    021-57745396
    13816629083