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紫外分光光度计测BSA浓度曲线时注意事项
  • 发布日期:2017-03-21      浏览次数:5534
    •   BSA即为牛血清白蛋白,在生化实验中有广泛的应用。BSA浓度可根据紫外分光光度计由曲线测得,到底是怎么一回事呢?
        紫外分光光度计测量蛋白浓度常可用经典公式:
        蛋白的浓度(mg/ml)=1.4280-0.74A260;
        也可同时读取一系列倍比稀释的已知蛋白含量的标准液的光密度值,做出标准曲线,后换算出浓度。
        紫外分光光度计测试需注意的是:
        1.用于仪器调零的液体与待测样品一致,标准蛋白也要使用同样的溶液;
        2.光密度值应该在0.1-0.8之间;
        3.要求蛋白质溶液*透明;
        4.对含量很低的蛋白质溶液可使用215/225nm的波长测定;
        5.使用蛋白质浓度范围为0.1-1.0mg/ml。
        配制浓度约为10mg/ml的BSA溶液,然后按一定倍数稀释,至低浓度为0.017mg/ml,用紫外分光光度计测试这一系列的BSA溶液的吸光度,做出标准曲线。根据测量结果而知,用紫外分光光度计测试牛血清白蛋白(BSA)的浓度,浓度太高曲线将逐渐平缓,而在0.02-2.0mg/ml浓度之间,基本能呈现出较好的线性。
     
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