由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线,根据这一特性,可对物质进行定性分析。由于物质浓度的不同,吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度也不相同,从而通过对物质吸光度或透过率的测量判定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础,也是美析仪器紫外可见分光光度计的工作原理。
紫外分光光度计的用途:
一、鉴定物质。用来测量待测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计;紫外可见分光光度计用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,也可以测定细菌细胞密度。
二、分光光度计的用途之二待测物质是标准物及标准图谱对照进行分析。
三、分光光度计的用途之三是比较最大吸收波长吸收系数的一致性。
四、分光光度计的用途之四是物质的纯度检验。
五、分光光度计的用途之五是推测化合物的分子结构及构成。
六、分光光度计的用途之六是判定络合物的组成及稳定常数的测定。